ABSTRACT
In the field of studies of acute toxicity induced by bacterial agents, Shiga toxins have been relevant due to the severity of the extra-intestinal diseases they cause. Numerous studies have shown that Shiga toxin induced apoptosis in different cell types; however, this important process has been little studied in vivo experimental models. In this study, the effects of excretion products of Shigella dysenteriae, in which Shiga toxin is present, were investigated on early larval stages of Zebrafish, an animal model with many advantages over other in vivo experimental models traditionally used. Both the collection of eggs and larvae of Zebrafish, and the product from excretion from Shigella dysenteriae (SdyEP) were performed according to laboratory standards. Also, toxicity bioassay, larvae treatment with pure and diluted solution, 10-1, 10-2, 10-3 , 10-4 and 10-5, v/v SdyEP and cell death in vivo using Acridine Orange (AO) and Ethidium Bromide (EB) were applied. The excretion product of Shigella dysenteriae (SdyEP) effect was expressed in terms of larval mortality and dependent dilution rather than incubation time. The larval population surviving treatment with Shigella excretion product presents severe morphological effects. The larval population generally presents notable severe morphological damage, the necrosis state is represented by the opacity of the larvae after being treated for 24 h (b) compared to control. Other changes associated with larval anatomy were also observed; particularly the caudal end curvature was significant into 10%. The use of AO/EB revealed a distribution pattern from fluorescence into green and orange in surviving larvae SdyEP poisoning, there was a large population of dead cells around the anal and caudal region as evidenced by the presence of orange nuclei in greater numbers as controls in the larvae. The results support the application of coloring AO/EB in Zebrafish experimental models for the evaluation of the toxic action of new molecules and new products with therapeutic potential.
En el campo de los estudios de toxicidad aguda inducida por agentes bacterianos, las toxinas Shiga resultan relevantes debido a la severidad de las enfermedades extra-intestinales que causan. Numerosos estudios han demostrado que la toxina Shiga induce la apoptosis en diferentes tipos de células, sin embargo, este importante proceso ha sido poco estudiado en modelos experimentales in vivo. En este estudio, fueron evaluados los efectos del productos de excreción de Shigella dysenteriae (PESdy), sobre estadios larvarios de pez cebra (Danio rerio), un modelo animal con muchas ventajas sobre otros modelos experimentales in vivo utilizados tradicionalmente. Tanto la recolección de los huevos y larvas de pez cebra, así como la obtención del producto de la excreción, se realizaron de acuerdo a los estándares de laboratorio. Poblaciones larvarias, fueron tratadas con distintas soluciones; pura y diluidas, 101, 10-2, 10-3, 10-4 y 10-5, v/v de PESdy. La muerte celular in vivo, usando naranja de acridina (NA) y bromuro de etidio (BE) fue evaluada. El efecto del SdyEP, se expresó como dependiente de la concentracion y del tiempo de exposición. La población de larvas sobrevivientes, presentaron curvatura troncal en un 10%, en relación a los controles. La necrosis se puso en evidencia a través de la opacidad de las larvas después de 24 h. El uso de NA/BE reveló un patrón de distribución de la fluorescencia en verde y naranja en larvas sobrevivientes al tratamiento. Una granpoblación de células muertas, alrededor de la región anal y caudal, se ponen en evidencia por la presencia de núcleos de naranja en mayor número que en los controles. Los resultados apoyan la aplicación de la coloración NA/BE en modelo experimental de pez cebra, para la evaluación de la acción tóxica de nuevas moléculas y nuevos productos de excreción bacterial con potencial terapéutico.
Subject(s)
Shigella dysenteriae/physiology , Zebrafish , Apoptosis , Shiga Toxin/toxicity , Acridine Orange , Ethidium , LarvaABSTRACT
In the field of studies of acute toxicity induced by bacterial agents, Shiga toxins have been relevant due to the severity of the extra-intestinal diseases they cause. Numerous studies have shown that Shiga toxin induced apoptosis in different cell types; however, this important process has been little studied in vivo experimental models. In this study, the effects of excretion products of Shigella dysenteriae, in which Shiga toxin is present, we investigated on early larval stages of Zebrafish, an animal model with many advantages over other in vivo experimental models traditionally used. Both the collection of eggs and larvae of Zebrafish, and the product from excretion from Shigella dysenteriae (SdyEP) were performed according to laboratory standards. Also, toxicity bioassay, larvae treatment with pure and diluted solution, 10-1, 10-2, 10-3 , 10-4 and 10-5 v/v SdyEP and cell death in vivo using Acridine Orange (AO) and Ethidium Bromide (EB) were applied. The excretion product of Shigella dysenteriae (SdyEP) effect was expressed in terms of larval mortality and dependent dilution rather than incubation time. The larval population surviving treatment with Shigella excretion product presents severe morphological effects. The larval population generally presents notable severe morphological damage, the necrosis state is represented by the opacity of the larvae after being treated for 24 h (b) compared to control. Other changes associated with larval anatomy were also observed; particularly the caudal end curvature was significant into 10%. The use of AO/EB revealed a distribution pattern from fluorescence into green and orange in surviving larvae SdyEP poisoning, there was a large population of dead cells around the anal and caudal region as evidenced by the presence of orange nuclei in greater numbers as controls in the larvae. The results support the application of coloring AO/EB in Zebrafish experimental...
En el campo de los estudios de toxicidad aguda inducida por agentes bacterianos, las toxinas Shiga resultan relevantes debido a la severidad de las enfermedades extra-intestinales que causan. Numerosos estudios han demostrado que la toxina Shiga induce la apoptosis en diferentes tipos de células, sin embargo, este importante proceso ha sido poco estudiado en modelos experimentales in vivo. En este estudio, fueron evaluados los efectos del productos de excreción de Shigella dysenteriae (PESdy), sobre estadios larvarios de pez cebra (Danio rerio), un modelo animal con muchas ventajas sobre otros modelos experimentales in vivo utilizados tradicionalmente. Tanto la recolección de los huevos y larvas de pez cebra, así como la obtención del producto de la excreción, se realizaron de acuerdo a los estándares de laboratorio. Poblaciones larvarias, fueron tratadas con distintas soluciones; pura y diluidas, 10-1, 10-2, 10-3 , 10-4 and 10-5 v/v de PESdy. La muerte celular in vivo, usando naranja de acridina (NA) y bromuro de etidio (BE) fue evaluada. El efecto del PESdy, se expresó como dependiente de la concentración y del tiempo de exposición. La población de larvas sobrevivientes, presentaron curvatura troncal en un 10 por ciento, en relación a los controles. La necrosis se puso en evidencia a través de la opacidad de las larvas después de 24 h. El uso de NA/BE reveló un patrón de distribución de la fluorescencia en verde y naranja en larvas sobrevivientes al tratamiento. Una gran población de células muertas, alrededor de la región anal y caudal, se ponen en evidencia por la presencia de núcleos de naranja en mayor número que en los controles. Los resultados apoyan la aplicación de la coloración NA/BE en modelo experimental...
Subject(s)
Animals , Apoptosis , Larva , Shigella dysenteriae/pathogenicity , Shiga Toxin/toxicity , Zebrafish , Acridine Orange , Cell Death , EthidiumABSTRACT
La toxicosis o intoxicación por monóxido de carbono, se debe a la hipoxia tisular originada por el desplazamiento de oxígeno de la hemoglobina, la cual tiene consecuencias funcionales importantes en los sistemas y órganos que requieran un abastecimiento continuo de oxígeno como cerebro y corazón. Es común la intoxicación aguda y crónica por monóxido de carbono y aunque las manifestaciones clínicas dominantes corresponden al sistema nervioso central, con frecuencia hay anormalidades cardíacas que en ocasiones son mortales. La toxicidad cardíaca es resultado de la hipoxia miocárdica y del efecto tóxico directo del gas sobre las mitocondrias del corazón. La afección miocárdica aparece de inmediato o varios días después de la exposición al monóxido de carbono. Son frecuentes las palpitaciones, la taquicardia, sinusal y diversas arritmias como extrasístoles y fibrilación auricular. En los enfermos con cardiopatía isquémica, puede precipitar angina de pecho e infarto del miocardio. Son muy frecuentes las anomalías del segmento ST y de la onda T en el electrocardiograma de superficie. Aquí reportamos el caso de un paciente, de 45 años, quien presentó signos de isquemia miocárdica, del tipo lesión subendocárdica antero lateral, en relación con intoxicación accidental con monóxido de carbono
Subject(s)
Male , Humans , Middle Aged , Carbon Monoxide Poisoning , Myocardial Ischemia , Cardiology , VenezuelaABSTRACT
Con el objetivo de identificar los efectos del fentanyl peridural como coadyuvante de los anestésicos locales para operación cesárea, se realizó un experimento clinico, aleatorizado, doble ciego y controlado en 60 maternas llevadas a cesárea en el Hospital Universitario Ramón González Valencia de Bucaramanga, Colombia. Treinta y una pacientes recibieron 2 cc. (100 mcgr.) de fentanyl junto a la dosis total de bupivacaína peridural, mientras que a veintinueve pacientes se les agregó 2 cc. de solución salina normal. Se aplicó dosis única de la mezcla anestésica y se registró la latencia del bloqueo sensitivo y motor. Se tuvo en cuenta, además, la calidad de la analgesia intraoperatoria y postoperatoria, medidas por medio de escala verbal simple y por la necesidad de analgesia suplementaria. Se registraron la cantidad y clase de efectos secundarios. Utilizando el promedio de las variables y determinando la significancia por medio de la t de Student, se obtuvo una latencia del efecto anestésico de 11.43 +/- 2.40 minutos para el grupo fentanyl y de 12.07 +/- 2.26 minutos para el grupo control; sin diferencias significativas. Un 43 por ciento de las pacientes que recibieron placebo necesitaron analgesia suplementaria, contra un 16.7 por ciento de quienes recibieron fentanyl ( p < 0.03). No se afectó el Apgar de los recién nacidos. No hubo diferencias en el comportamiento postoperatorio entre los grupos. Igualmente los efectos secundarios fueron similares, con leve ventaja para el fentanyl, en referencia a escalofríos. Concluimos que la real ventaja de adicionar fentanyl a la bupivacaína peridural es la mejoría de la calidad de la analgesia intraoperatoria. No son claros sus beneficios sobre el aspecto preoperatorio y postoperatorio
Subject(s)
Anesthesia, Epidural , Bupivacaine/administration & dosage , Bupivacaine/pharmacology , Bupivacaine/chemistry , Cesarean Section/methods , FentanylABSTRACT
Las cepas de Clostridium, productoras de solventes y áci-dos, han sido caracterizados empleando una amplia gama de técnicas fisiológicas, bioquímicas y moleculares. Los trabajos más recientes han clasificado estos mi-croorganismos en cuatro grupos y es de esperarse que mu-chos de los microorganismos anaerobios solventogénicos estén fuera de esta clasificación. El presente trabajo estu-vo orientado a caracterizar molecularmente por 16S rARN trece cepas silvestres de Clostridium seleccionadas por su mayor capacidad para producir solventes con respecto a la cepa patrón de Clostridium acetobutylicum ATCC824. Se hizo la secuenciación parcial del gen 16S rARN, sobre su segmento final (aproximadamente 700 pb). Para anali-zar las secuencias, se calculó p y se construyó el dendograma empleando neighbor-joining. Se pudo obser-var que las cepas silvestres no pertenecen a ninguno de los cuatro grupos de Clostridium solventogénicos sino que están cercanamente relacionadas con Clostridium butyricum.
Subject(s)
Clostridium , RNAABSTRACT
El tratamiento de ovinos y caprinos con Albendazole a la dosis de 7,5 mgkg-1, determinó una drástica reducción en el número de huevos por gramo de heces de estróngilos digestivos, sin lograr la negativización de los animales. Así mismo, es importante señalar que a los 14 días post-tratamiento se observó un incremento marcado en el mencionado conteo. En el caso de la monieziosis de los ovinos, se evidenció una elevada eficacia del producto, ya que no se detectaron después del tratamiento ni huevos en el examen de heces ni proglótides en estas últimas. No se observó resistencia de los parásitos presentes contra el antihelmíntico empleado